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卢旺

细胞生物学硕士生在读, 正在努力学习数理化

但尽人事 不问前程

荧光寿命显微镜的原理及其相图的Python绘制(Phasor Plot for FLIM-FRET)

  • 荧光寿命是指荧光分子在被激发后,能量从激发态回落至基态所需时间的一半($t_{1/2}$),是荧光分子的固有物理性质(在没有其他因素干扰时,通常是一个常数),是荧光分子除了在波长、偏振、强度之外的另一可以用以挖掘的角度
  • 荧光寿命的测量需要使用荧光寿命显微镜(FLIM),目前最常用的测量方法是时间相关单光子记数法(Time-Correlated Single-Photon Counting ,TCSPC),该方法是在短时间激活荧光分子后,连续一段时间测量光强(光子个数),从而绘制出荧光强度的衰减曲线,并在此基础上拟合指数函数
  • 激活的频率是需要适应测量荧光分子的寿命,因为需要等待一段时间进行测量,这个时间太长和太短都不好,生物荧光分子的寿命通常在12ns以下,因而多使用80MHz的频闪激光作为光源

荧光显微镜的共定位分析及绘图的Python脚本(含代码下载链接)

共定位是荧光图像能够得到的最最基础的信息,其可以作为分子互作的弱证据,分子在特定结构富集的强证据。该分析的常见操作是使用ImageJ的line profile功能,但在imageJ中完成时,无法很好地绘制出好看的图,并准确输出划线的位置。本脚本是基于Python的,给实验室做共定位分析绘图用的,可以直接使用命令行调用,自动排图并计算皮尔逊相关系数

AlphaFold可以做什么?

我自20年底AlphaFold2一战成名后就开始关注该模型,这篇文章是2021年10月,AlphaFold文章正式在Nature发布后,给实验室非计算机背景的同门写下的一些自己在应用层面的理解,时隔两年再次读起,发现本文一些观点已经不再正确了(比如AlphaFold官方已经开发了复合体的预测模型),但作为对当年学习的记录,就不再更正原文